質(zhì)量－（面粉過(guò)氧化苯甲酰速測(cè)盒）
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培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
適應(yīng)：科研實(shí)驗(yàn)
保存溫度: 2~8°
規(guī)格：100批次/盒
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本，2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本，1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照
96T-84個(gè)樣本
48T-42個(gè)樣本
操作步驟：

1.   使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.   根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3.   加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
4.   甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6.   甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7.   每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
8.   取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
9.   在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。多年專業(yè)酶免服務(wù)，質(zhì)量，含稅含運(yùn)費(fèi)，期待與您的合作！

測(cè)試步驟：
（1）仔細(xì)切開覆蓋在孔板上的箔片，從微孔板底部用手指輕輕頂出所用的孔板。注意不要損傷不使用的孔板上的條或孔，而且應(yīng)將其立即用塑料袋密封放入2-8℃的冰箱保存，以防止瓊脂變干；
（2）揭開覆蓋在孔板上的箔片，每孔加入80mL牛奶樣品。并分別加入80mL的陰性和陽(yáng)性質(zhì)控，加入樣品時(shí)應(yīng)避免交叉污染；
（3）用密封膠將孔板密封，置于65℃恒溫箱或水浴箱中孵育直到陰性質(zhì)控轉(zhuǎn)化成淺黃綠色（參照每批質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告,大約需要1小時(shí)45分鐘）。
注：如果是采用水浴進(jìn)行孵育的話，請(qǐng)注意避免水進(jìn)入微孔。樣品孵育時(shí)間不能超過(guò)質(zhì)檢報(bào)告中說(shuō)明的時(shí)間，否則檢測(cè)靈敏度會(huì)下降。

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更新時(shí)間：2024/12/9 9:53:36