產(chǎn)品名稱：大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑試劑盒　
ELISA的樣本收集與前期準備
利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
（一） 臨床樣本的收集
A、血液樣本
有些生理因素，如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化，有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾，以條件一致為宜，如無法避免，應在標本上注明該因素。
1．外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血，該部位應無凍瘡，炎癥，水腫，破損。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替。對燒傷病人，可選擇皮膚完整處采血。由于部分 血液常規(guī)檢測（如白細胞計數(shù)、分類等）受生理因素影響波動過大，比較時宜使條件盡量一致。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測項目（如血小板計數(shù)，出血時間或凝 血時間等）的檢測，一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物，以便在減少或避免干擾因素的影響。
2．靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外，目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中，有些（如血糖，血脂 等）受飲食及晝夜因素影響較大，一般以清晨空腹血標本為宜；有些在血中衰變較快（血清酶活性測定如ACP活性等），0~4℃貯存活性減弱也不一，這些項目 的檢測必須及時而快速；有些（如肌酸激酶等）受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要，尤其涉及血鉀，LDH等的測定。
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑試劑盒具有快速、敏感、簡便、易于標準化等優(yōu)點，本司供應試劑盒種屬有人（Human）、大鼠（Rat）、小鼠（Mouse）、兔（Rabbit）、豬（Pig）、猴（Monkey）等；中英文雙版說明書。
B、尿液樣本
同血標本一樣，尿液標本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大，特別是飲食的影響，故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的次尿標本，較濃 縮和酸化，有形成分（如血細胞，上皮細胞，管形）相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿，留取方便，但受飲食、運動、藥物影響較甚，易于出現(xiàn)假陽性和假陰 性結(jié)果，如飲食性蛋白尿，飲食性糖尿，維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿（午餐后2小時收集的患者尿液）適用于尿糖，尿蛋白和尿膽原的檢查，此時的尿標本可 增加試驗敏感性，檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)（前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液），因時間較長，細菌易繁殖，須 加入防腐劑甲醛。24小時尿（天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液）中化學物質(zhì)的定量，包括蛋白，糖，尿17-酮、17-羥類固醇，兒茶酚 胺，Ca2+等，檢測不同的物質(zhì)，選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng)，要求無菌，沖洗外陰后留取標本。所有尿標本的收集都應足量，*少 12 ml，50 ml，定時尿須全部收集，對女性患者應避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標本。
C、糞便樣本
糞便標本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便，對外觀無異常的糞便須從表面、深處及 糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應于排便后立即檢查，從有膿血和稀軟處取材，保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵 時應取粘液、膿血部分，孵化毛蚴時至少留取30g糞便，且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡 檢。隱血試驗（化學法），試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑，維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內(nèi)應檢查完畢，以防止有形成分受消化酶及 pH的破壞,來不及檢測的，應及時用PBS進行緩沖處理，離心去上清保存。
D、腦脊液樣本
腦脊液標本采集后立即送檢，放置過久將影響檢驗結(jié)果：如細胞變性，破壞，導致計數(shù)和分類不準；有些化學物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少；細菌發(fā)生自溶影響細 菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管，管作細菌培養(yǎng)，第二管作化學分析和免疫學檢查，第三管作一般性狀及顯微鏡檢查，三管的順序不宜顛倒。因 標本采集較難，全部送檢和檢測過程應注意安全。
E、胸腹水樣本
與腦脊液標本一樣，采集后的標本注意安全，及時送檢。一般也分裝三管，一管作常規(guī)細胞學檢查，一管生化檢查，一管細菌培養(yǎng)，順序以與腦脊液相同為宜。
F、前列腺液樣本
前列腺液標本由前列腺按摩后采集，液量少時直接滴在載玻片上及時送檢，須注意防止標本蒸干，量多時收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液，可檢查按摩后的尿液沉渣。
G、精液樣本
精液標本采集前應禁欲3~7天，排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中，保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大，一般應檢查2~3次（每次間隔1~2周）方可做診斷。
H、陰道分泌物樣本
陰道標本采集前24小時應禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等，取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材，制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本，經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑試劑盒由上海恒遠生物科技有限公司生物專業(yè)提供，有96T/48T兩種規(guī)格，包括96/48孔酶標包被板、酶標試劑、樣品稀釋液、顯色劑AB液、標準品、濃縮洗滌液,封板膜,說明書等。
ELISA的樣本實驗準備
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行
檢測的樣本，及時儲存在4℃?zhèn)溆谩�對于隔天再檢測的樣本，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫�有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆谩�標本應避免反復凍融�?/span>
液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2. 血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
3. 尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
5. 培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞 并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
6. 組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。標本融化后仍然保�?-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
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更新時間：2024/12/9 9:53:43